The importance of environments and surfaces hygienization in pandemic times (Covid-19): a microbiological analysis in places for physical activity practice

The objective of this study was to analyse microbiological organisms in different locations and regions for physical activity in the city of João Pessoa, Brazil. Samples were collected on various objects used, such as: mattresses, drinking fountains, gloves, cell phones and others. The samples were collected in João Pessoa-PB, following the Standard Operating Procedure-SOP/ Microbiology of a specialized laboratory. The collection took place in the five macro-regions: North, South, East, West and Center. Foreach region samples were collected in one public place (square), a private one (gym) and one school (public or private), totaling fifteen collected sites and 450 samples. The following microorganisms were studied in all analyzed surfaces: Bacillus sp, Escherichia Coli, Klebsiella sppor Enterobacter sppand Coag. Neg. Staphylococcus.All regions had a high contamination level by some microorganism. The highest rates were found in the western, central and northern regions -96, 94 and 93% respectively. The Coag. Neg.Staphylococcus presented the highest and lowest incidence rates in the South and East regions, with 43.33 and 6.67%, respectively, as well as Klebsiella sppor Enterobacter spp, which presented high levels. It is concluded that there is a microorganisms' contamination in the most varied places and regions where physical activity practices are developed, with a predominance of Coag. Neg.Staphylococcusand Klebsiella sppor Enterobacter spp. These results lead to a warning about the hygiene importance in places for physical activity practice, especially in pandemic times (COVID-19), since almost all the evaluated surfaces were contaminated.

Avaliação da alfa-glicosidase Cqm1 de Culex quinquefasciatus e o impacto de suas mutações na fisiologia de larvas / Evaluation of a-glucosidase Cqm1 from Culex quinquefasciatus and the impact of its mutations on larvae physiology

Lysinibacillus sphaericus (Lsp) e uma bacteria entomopatogena que produz a toxina Binaria (Bin) com atividade larvicida para culicideos. A sua acao em Culex quinquefasciatus depende da ligacao da toxina Bin a alfa-glicosidase (Aglu) Cqm1, que atua como receptor no epitelio intestinal de larvas. Na colonia R2362, foram caracterizados dois alelos de resistencia ao Lsp: cqm1REC e cqm1REC-2, cujas mutacoes impedem a expressao da Aglu Cqm1. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade catalitica da Cqm1 e comparar a atividade alfa-glicosidase e o desenvolvimento pre-imaginal de larvas de individuos susceptiveis (S) e resistentes (R) para cada alelo. Para isto, foram avaliados os seguintes parametros: atividade catalitica da Cqm1 recombinante; padrao de transcricao de outras Aglus paralogas a Cqm1; atividade de Aglus nativas em larvas; sobrevivencia de individuos frente a diferentes dietas. A Aglu Cqm1 mostrou atividade enzimatica otima a 37o C, pH 7,5-8,0 e utilizando o substrato sintetico pNalfaG. A atividade alfa-glicosidase total em larvas S e R foi similar, apesar da ausencia de expressao da Cqm1 nas larvas R. A investigacao in silico revelou 18 proteinas paralogas a Cqm1 e, dentre 11 investigadas, nove sao expressas em larvas S e R. A analise quantitativa de tres paralogas demonstrou que duas tem um padrao de transcricao mais elevado em larvas resistentes, sugerindo a existencia de um mecanismo de compensacao de expressao de alfa-glicosidases. O desenvolvimento pre-imaginal de larvas S foi decrescente nas seguintes dietas: racao de gatos, racao de peixes, leite desnatado, extrato de levedura e sacarose. De uma forma global, a taxa de sobrevivencia de larvas R foi inferior a S em todas as dietas testadas. Os dados obtidos mostram que as mutacoes ligadas aos alelos cqm1REC e cqm1REC-2 nao parecem impactar a atividade Aglu nas larvas e que o custo biologico observado poderia estar relacionado a outros genes e vias metabolicas.

Caracterização e detecção molecular de alelos de resistência ao biolarvicida Bacillus sphaericus em culex quinquefasciatus / Characterization and molecular detection of resistance alleles to the Bacillus sphaericus biolarvicide in Culex quinquefasciatus

A resistência de Culex quinquefasciatus à toxina inseticida (Bin) de Bacillus sphaericus (Bsp) pode estar associada a uma falha da ligação da toxina com os receptores Cqm1, localizados no microvilli intestinal das larvas através de uma âncora GPI. Mutações no gene cqm1 podem impedir a expressão de proteínas Cqm1 funcionais e gerar um alto nível de resistência. O objetivo deste trabalho foi caracterizar e avaliar a frequência de alelos de resistência (r) em populações e colônias de C. quinquefasciatus. Neste estudo, o alelo r cqm1REC, selecionado e identificado anteriormente na colônia R2362, foi detectado por PCR alelo-específica em quatro populações de Recife com frequências entre 0,001 e 0,017. Em duas populações foram identificados novos alelos r, o cqm1REC-D16 e o cqm1REC- D25, com frequência entre 0,002-0,006. Estes alelos são caracterizados por deleções de 16 e 25-nt, respectivamente, as quais geram códon de terminação da tradução prematuro (CTTP) e não codificam proteínas com âncora GPI. Um segundo alelo r (cqm1REC- 2) foi identificado na colônia R2362 e possui uma mutação nonsense (G1292A) que também gera um CTTP, impedindo a localização de receptores Cqm1 no epitélio. O alelo cqm1REC-2 foi co-selecionado com o cqm1REC na colônia R2362 e uma análise da competição entre eles mostrou que o cqm1REC-2 predomina sob pressão de seleção com Bsp, enquanto que o cqm1REC é majoritário na ausência de Bsp. A expressão relativa dos alelos cqm1REC e cqm1REC-2, avaliada por PCR em tempo real, mostrou que ambos possuem uma expressão significativamente menor em relação ao cqm1. Amostras de microvilli intestinal de larvas homozigotas para cada alelo apresentaram uma baixa capacidade de interação com a toxina Bin, corroborando os dados de expressão gênica e o fenótipo de resistência. Este estudo mostrou a detecção e caracterização de novos alelos de C. quinquefasciatus que conferem resistência a Bsp e estes dados são fundamentais para o diagnóstico e manejo da resistência em programas de controle.

Evaluación de la persistencia de una formulación comercial de Bacillus sphaericus en criaderos naturales de anofelinos vectores de malaria en estado Bolívar, Venezuela / Evaluation of the persistence of a comercial formulation of Bacillus sphaericus in malaria vectors anopheline larval hábitats in Bolívar state, Venezuela

El municipio Sifontes del estado Bolívar es la principal área endémica a malaria de Venezuela. Durante los últimos cinco años se ha reportado en este municipio un promedio anual cercano a 15 mil casos, alcanzándose durante 2009 la cifra de 20.282, lo que constituye una situación de epidemia. En este municipio se evaluó la persistencia de una formulación comercial de Bacillus sphaericus Neide (Vectolex CG 7,5%) en criaderos naturales de Anopheles marajoara, An. triannulatus y An. braziliensis. Para ello se realizaron dos experimentos en los cuales se evaluaron las dosis de 2 y 3 gr/m2 durante 60 y 90 días. Los resultados indican que hay diferencias en la persistencia por tipo de criadero y especie de anofelino. La tendencia general para todas las especies indica que el porcentaje de reducción de la población larvaria fue de 100% durante la primera semana, luego disminuyó paulatinamente hasta más o menos 40% después de los 28 días, para luego recuperarse a alrededor de 60% a los 45 días, manteniéndose así hasta el día 90 con ambas dosis. Este comportamiento es más evidente para An. marajoara, mientras que con An. triannulatus la eficacia se mantiene alrededor de 80% durante 90 días con 3 gr/m2. Sobre An. braziliensis, la eficacia se mantiene en 100% hasta el día 14 con ambas concentraciones, para luego caer abruptamente sin recuperación. Es la primera vez que se evalúa B. sphaericus sobre estas especies de anofelinos en Venezuela, considerándose estos resultados muy prometedores para el control de vectores

Sifontes municipality in Bolivar state is the main malaria endemic area in Venezuela. During the last five years an annual average of 14,000 cases has been reported, reaching 13,450 during 2008, resulting in an epidemic situation. A commercial formulation of Bacillus sphaericus Neide (Vectolex CG 7.5%), was evaluated in larval habitats of Anopheles marajoara, An. triannulatus and An. braziliensis. Two experiments were carried out in a lagoon and a pasture inundated area, 2 and 3 gr/m2 doses were evaluated during 60 and 90 days. The results point out that there are differences in the persistence depending on the type of larval habitat and anopheline species. The general trend indicated that for all the species the persistence of the Vectolex, therefore the reduction of the larval population was 100% during the first week. However, it felt under 40% after day 28, then recovered by day 45, and remaining around 40% for 90 days with both doses. A similar pattern was observed for An. marajoara, whereas for An. triannulatus the efficacy remained around 80% during 90 days only at 3 gr/m2. With An. braziliensis there was 100% persistence until day 14 with both doses, for then felt abruptly without recovering. This is the first time that B. sphaericus was evaluated for these anopheline species in Venezuela, considering these results promissory for the malaria control program

Rotational application of bioinsecticide with deltamethrin-An antilarval measure for the control of filarial vector, Culex quinquefasciatus (Culicidae: Diptera).

A laboratory investigation was undertaken to study the cyclic usage of field recommended doses of Bacillus thuringiensis israelensis (Bti), Bacillus sphaericus (Bsp) and combination of Bti and Bsp (half the recommended dose of each) with deltamethrin 2.8 EC to attain better control of mosquito larvae. To understand the susceptibility status of the Culex quinquefasciatus larvae in the field, early fourth instar field collected larvae were exposed to the above treatments of biopesticides and were monitored for their persistency till 50% mortality was obtained. The larvae those survived in each treatment were transferred to the concentration of deltamethrin that gave 50% mortality. Observations on larval mortality after the treatment with deltamethrin were recorded after 24 h. The results revealed that Bti excels Bsp, as it recorded 54% mortality only on 17th day after application. The other salient finding of this study is LC50 of deltamethrin is sufficient to follow the biopesticides application for an effective control of Culex larvae.

Studies on the Bacillus sphaericus larvicidal activity against malarial vector species in Amazonia

In this work, bioassays were carried out in laboratory conditions (average temperature 26 ñ 2ºC) to test ten strains of Bacillus sphaericus, isolated from Brazilian soils third instar larvae from anopheline species recorded as malaria vectors in Amazonian - Anopheles nuneztovari and An. darlingi. With the former mosquito, three strains - S 2', S 20 and S 46 showed relative activity, in 24 and 48 hr exposure to the B. spahericus strains. With the latter only the S 20 were effective in the 48 hr reading. The studied strains that showed the most adequate response in the Amazonian region were S 2 and S 20 showing broader and more efficient results. Therefore, S2 was the most effective when the 24 and 48 hr reading were considered, because it showed the greatest relative activity values.

Sepsis y meningitis neonatal por Bacillus no anthracis / Neonatal sepsis and meningitis due to Bacillus non-anthracis

Los casos de infección diseminada por Bacillus spp, son poco frecuentes, habiéndose reportado seis casos en recién nacidos en los últimos 40 años. Se presenta el informe de dos casos de recién nacidos, uno pretérmino y otro de término que cursaron con sepsis y meningitis el primero y con sepsis el segundo paciente. Los factores predisponentes fueron prematurez y asfixia perinatal. Las especies identificadas fueron Bacillus cereus en un caso y Bacillus spp, en el otro. En el grupo de recién nacidos no debe de considerarse como contaminación el aislamiento de Bacillus spp, en líquidos biológicos enviados a cultivo, debiendo correlacionarse con la presencia de datos clínicos